1

細胞老化

在原代細胞培養(yǎng)的過程中，由于細胞老化而出現(xiàn)空泡的情況較為常見。原代細胞體外增殖能力有限，當細胞在體外培養(yǎng)時間過長，會因自發(fā)老化而產(chǎn)生空泡，甚至導致細胞死亡。同樣的，對于細胞系來說，隨著傳代次數(shù)的不斷增加，細胞也可能因老化而產(chǎn)生空泡。

2

更換培養(yǎng)基或血清或培養(yǎng)基理化性質(zhì)改變

更換細胞使用的培養(yǎng)基或血清，細胞可能會出現(xiàn)不適應的情況，導致空泡的產(chǎn)生；細胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基，若因配制錯誤、儲存不當、過期仍使用或是血清質(zhì)量不過關等，均可能引發(fā)培養(yǎng)基的理化性質(zhì)如pH、滲透壓等發(fā)生改變，進而影響細胞狀態(tài)，甚至導致細胞出現(xiàn)空泡。

3

細胞消化不當

在處理如貼壁細胞等需要消化的細胞時，解離試劑的選擇、消化時間的控制、操作力度的把握等都至關重要。解離試劑選擇不當，消化時間過長或操作力度過大等均可能導致細胞受損，進而引發(fā)細胞空泡的產(chǎn)生。

4

傳代或換液不及時

細胞長滿后未及時傳代或細胞長時間未換液，會導致培養(yǎng)過程中細胞代謝副產(chǎn)物的累積和營養(yǎng)物質(zhì)的耗盡，可能誘導細胞自噬的發(fā)生，進而細胞出現(xiàn)空泡化。

5

細胞污染

在細胞培養(yǎng)的過程中，若出現(xiàn)細菌、支原體、黑膠蟲等污染，將會導致細胞狀態(tài)明顯變差，并可能引發(fā)細胞產(chǎn)生空泡等異?，F(xiàn)象。

6

細胞藥物處理

在細胞實驗中，研究人員可能會加入特定的藥物（如氯喹、氨基糖苷類抗生素、細胞凋亡誘導劑等）對細胞進行誘導處理。這些藥物通過影響細胞的代謝過程誘導細胞發(fā)生特定的生物學變化，但也可能產(chǎn)生細胞毒性，進而可能導致細胞內(nèi)出現(xiàn)空泡甚至引發(fā)細胞死亡。

圖2. MC3T3-E1 Subclone 14細胞經(jīng)過快遞運輸刺激收貨時細胞狀態(tài)

圖3. MC3T3-E1 Subclone 14細胞穩(wěn)定傳代后